產(chǎn)品詳情
95-d細(xì)胞
- 產(chǎn)品名稱：95-d細(xì)胞
- 產(chǎn)品型號：95-d
- 產(chǎn)品廠商：乾思中心
- 產(chǎn)品文檔：
你添加了1件商品 查看購物車
簡單介紹
95-d細(xì)胞
95-d細(xì)胞
的詳細(xì)介紹人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞（95-D)
注意事項：
收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立
即與我們聯(lián)系。
所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物**臺內(nèi)操作，并請注
意防護，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
細(xì)胞介紹
這是一株高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞。
細(xì)胞特性
1)來源：肺癌
2)形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
運輸和保存：可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式：（1)干冰運輸，收到后
立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇；（2)存活細(xì)胞，收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達到細(xì)
胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
細(xì)胞用途：僅供科研使用。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1.準(zhǔn)備 RPIVM-1640 培養(yǎng)基(RPIVM-1640:GIBCO,貨號 31800022,添加 NaHC03 1.5g/L,
D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸鈉O.llg八)，90%;上等胎牛血清，10%。
2. 培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱
濕度為70%-80%。
3.凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細(xì)胞處理：
復(fù)蘇細(xì)胞：將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加
入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補
加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?
細(xì)胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并檢
查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37°C培
養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部
分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止
消化。
按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分
鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者
瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL
培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的
新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)
胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄
去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約lml含血清的培養(yǎng)基后
加入凍存管中，再添加1〇%DMSO后進行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞
收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走)，加
入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入1〇%DMSO后進行凍
存。